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钝裂银莲花ISSR—PCR反应体系优化

孙涛 刘左军 孙文斌 刘凤梅 李冰 草业科学 2012年第01期

摘要:本研究以改良的CTAB法提取的甘肃合作钝裂银莲花(Anemone obtusiloba)基因组DNA为模板,通过正交和单因素试验,探讨引物浓度、聚合酶浓度、Mg^2+浓度、dNTPs浓度和模板浓度对银莲花ISSRPCR扩增的影响。结果表明,钝裂银莲花1SSRPCR最佳反应体系:总体积20μL,模板浓度20ng,聚合酶2U,Mg^2浓度2.5mmol·L^-1,dNTPs浓度0.3mmol·L^-1,引物浓度0.4mmol·L^-1,引物UBC807退火温度为51℃。

关键词:钝裂银莲花issrpcr反应体系正交优化

单位:兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃兰州730050

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