摘要:以本氏针茅(Stipa bungeana)幼嫩叶片为材料,建立适合本氏针茅基因组I)NA提取的改良CTAB法,在此基础上采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法,对本氏针茅SRAPPCR反应体系中的5个主要因素(DNA、Taq酶、dNTPs、Mg^2+和引物)进行优化,旨在建立适合本氏针茅SRAP分析的反应体系。结果表明,在20pL总的反应体系中各组分的加入量分别为:DNA(20ng·μL^-1)3μL、TaqDNA酶(5U·μL^-1)0.2μL、dNTPs(2.5mmol·L^-1)1.4μL、引物(10μmol·L^-1)1.0μL、Mg^2+(25mmol·L^-1)2.0μL、10×Buffer2.5μL ddH208.9μL。体系验证和引物筛选试验表明,该体系适于本氏针茅遗传多样性分析,该体系的建立可为本氏针茅种质资源遗传多样性研究和黄土高原植被恢复及生态建设提供理论基础。
关键词:本氏针茅 srap 体系优化 引物筛选
单位:西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌712100 西北农林科技大学资源与环境学院 陕西杨凌712100 中国科学院水利部水土保持研究所 陕西杨凌712100
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