摘要：以马铃薯软腐病菌Erwinia carotovora subsp.carotovora71（Ecc71）为材料,利用同源克隆技术克隆软腐病果胶酸盐裂解酶（pel）、多聚半乳糖醛酸酶（peh）、纤维素酶（cel）和蛋白酶（prt）基因,对其进行生物信息学分析,并将其克隆到原核表达载体pET28a中,将重组载体pET28a-pel、pET28a-peh、pET28a-cel和pET28a-prt转化至大肠杆菌E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定和酶活测定,得到了与理论推算的pel、peh、cel和prt基因表达产物分子质量相符的特异条带,并且其酶活性分别为1.672U·mL-1·h-1和0.024、112.7、16.95U·mL-1·min-1。这些结果为今后探究这4种酶之间的相互作用及马铃薯抗病性研究奠定了基础。

关键词：马铃薯 软腐病 致病因子 克隆 原核表达 

单位：甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室-甘肃省干旱生境作物学重点实验室 甘肃兰州730070 甘肃农业大学农学院 甘肃兰州730070