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沙打旺黄矮根腐病菌钙调素基因的克隆

刘建利 李彦忠 草业科学 2015年第05期

摘要:沙打旺埃里砖格孢(Embellisia astragali)引起的黄矮根腐病是造成沙打旺(Astragalus adsurgens)草地退化最严重的病害之一。钙调素是Ca2+介导的信号通路中重要的分子。本研究旨在从沙打旺埃里砖格孢中克隆钙调素编码基因序列。以基因组DNA为模板,采用简并引物CAL-228F和CAL-737R扩增得539bp的同源片段;采用Hi-TAIL PCR分别获得344bp的5′侧翼序列和729bp的3′侧翼序列,拼接获得基因的1 290bp的全长DNA序列;利用全长引物CaMF和CaMR,得到840bp的DNA全长序列和450bp的cDNA全长序列,DNA全长序列中有4个内含子,均具有典型的AT-AG特征,cDNA全长序列翻译出149氨基酸多肽。

关键词:pcr沙打旺埃里砖格孢钙调素基因克隆

单位:草地农业生态系统国家重点实验室兰州大学草地农业科技学院 北方民族大学生物科学与工程学院 中国农业科学院草原研究所

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