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光合细菌羰基还原酶不对称还原苯乙酮的研究

王梦亮 岳竹 分子催化 2010年第01期

摘要:从本实验室筛选得到的类球红杆菌(Rhodobacter sphaeroides)中,通过超声破碎、硫胺沉淀、DEAE—Sephadex A-25阴离子交换层析分离得到一种较纯的依赖NADPH的羰基还原酶.对其进行SDS-PAGE电泳分析,显示一条带,测得其相对分子量约为37kD.建立了羰基还原酶催化苯乙酮反应体系并对其进行优化,得出该酶催化苯乙酮的最适反应pH值为8,最适温度为37℃,在pH值为7—9之间比较稳定,其热稳定性较低.该酶对苯乙酮的米氏常数K。和最大反应速率Vmax分别为0.26mmol·L。和2.4μmol·min^-1·mg^-1,最佳反应时间为24h.催化苯乙酮的主要产物为(S)-苯乙醇,其产率为58.5%,ee值可达到99%以上,是很有前景的生物催化剂之一.对酶催化与辅酶再生体系相结合进行了初步的研究,提出了氢化酶再生辅酶与菌绿素再生辅酶体系,为今后的酶催化工业生产奠定了基础.

关键词:类球红杆菌羰基还原酶苯乙酮

单位:山西大学应用化学研究所 山西太原030006

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