摘要：目的 克隆人软骨调节素I（CHM-D cDNA，并在原核表达系统中表达和纯化。方法 利用RT—PCR技术从人软骨组织中扩增出CHM-I基因片段，并将其克隆到原核表达载体pET28a中，转化至大肠杆菌BL21（DE3），IPTG进行诱导表达；对在N末端融合了6×His纯化标签的表达产物进行Western blot分析和用Ni2＋2NTA离子交换树脂进行纯化；纯化蛋白进行SDS-PAGE纯度分析。结果 获得了人软骨调节素cDNA，并成功构建了高效原核表达质粒pET（CHM-I），能有效表达CHM-I蛋白，且CHM—I蛋白的纯度高于90％。结论 原核表达系统可有效克隆较高纯度的CHM-I基因。

关键词：软骨调节素 克隆 表达 

单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科; 武汉430030