摘要：目的探讨感觉神经肽P物质（substance P,SP）对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）增殖的影响并初步揭示其中可能的机制。方法体外培养SD（Sprague-Dawley）大鼠BMSCs。细胞增殖-毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8,CCK-8）法检测不同浓度SP刺激下的BMSCs增殖活性;在10-8 mol/L的SP刺激下,采用实时荧光定量PCR（real-time qPCR,RT-qPCR）检测第1、3、5和7天时Wnt/β-catenin信号通路相关基因（β-catenin、c-myc、cyclin D）的表达情况。SP组单纯添加10-8 mol/L的SP,SP＋LiCl（糖原合成激酶-3的抑制剂LiCl）组在SP组基础上添加6×10-3 mol/L的LiCl,SP＋Dkk-1（Dickkopf-1）组在SP组基础上添加10-9 mol/L的Dkk-1,以添加等量聚丁烯琥珀酸酯（poly butylenes succinate,PBS）为空白对照组。结果 CCK-8法显示SP明显促进BMSCs增殖,以10-8 mol/L的SP作用最为显著。RT-qPCR结果显示SP刺激下,β-catenin、c-myc、cyclin D的mRNA表达有显著差异,10-8 mol/L的浓度差异最为显著,并且呈明显的时间依赖,第5天mRNA表达出现顶峰。并且SP＋LiCl组β-catenin、c-myc、cyclin D的mRNA和蛋白水平显著增强,而SP＋Dkk-1组明显抑制。结论 SP通过激活Wnt/β-catenin通路而显著促进BMSCs增殖。

关键词：感觉神经肽p物质 骨髓间充质干细胞 增殖 

单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科 武汉430030