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基质细胞衍生因子-1对小鼠关节软骨细胞自噬水平的影响

张津铭; 吕正涛; 卢伟伟; 李兴艳; 董永辉; 祁军; 黄晖; 郭风劲; 陈安民 骨科 2016年第04期

摘要:目的通过研究基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor?1, SDF?1)对小鼠关节软骨细胞自噬的影响,探讨SDF?1在骨性关节炎中的作用及机制。方法分离并体外培养小鼠关节软骨细胞,分别予以0、1、10、100、1 000 μg/L浓度的五组重组SDF?1蛋白干预24 h。运用RT?PCR检测各组细胞的微管相关蛋白1 轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)和UNC?51 样激酶复合物1(uncoordinated?51 like kinase 1, ULK1)mRNA 表达情况,运用Western Blot 方法检测LC3?Ⅱ、LC3?Ⅰ、ULK1及泛素连接蛋白62(ubiquitin?binding protein p62, p62)蛋白表达水平,通过透射电镜观察自噬溶酶体。结果RT?PCR结果显示10、100、1 000 μg/L浓度条件下LC3、ULK1的mRNA水平明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示1、10、100、1 000 μg/L的各组细胞的LC3?Ⅱ/LC3?Ⅰ比值、ULK?1表达水平较对照组升高,p62蛋白表达水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示经SDF?1干预后,自噬溶酶体较对照组增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论SDF?1可诱导小鼠关节软骨细胞自噬的发生,SDF?1可能通过调节软骨细胞自噬水平参与了骨性关节炎的进展。

关键词:软骨细胞自噬骨关节炎

单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科; 武汉; 430030

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