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Kartogenin与TGF-β3/BMP-2/DEX对兔滑膜间充质干细胞增殖及成软骨分化的对比研究

谢金硕; 周义钦; 陈松; 邵加华; 符培亮; 许震宇; 吴海山 骨科 2016年第05期

摘要:目的 比较Kartogenin(KGN)与转化生长因子β3(TGF-β3)/骨形态发生蛋白2(BMP-2)/地塞米松(DEX)对兔滑膜间充质干细胞(synovial-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)增殖及成软骨分化的作用。方法 于6~10月龄新西兰大白兔膝关节处滑膜中分离培养SMSCs,并进行鉴定。设置KGN组(采用KGN干预)、T/B/D组(TGF-β3/BMP-2/DEX联合干预)及空白对照组,采用PELLET系统培养法分别培养各组细胞。通过比较各组细胞的增殖速度、软骨微球的直径和重量、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)表达情况、成软骨分化相关标志基因表达及蛋白质合成量等指标来评价KGN对SMSCs增殖及成软骨能力的影响。结果 成功从兔膝关节滑膜分离出SMSCs;KGN组的SMSCs增殖能力弱于T/B/D组,但KGN组软骨微球直径最大,重量最重,Ⅱ型胶原合成量最多,且均显著高于其他组;PCR及Western Blot结果表明KGN组成软骨分化相关基因的表达最强,蛋白质合成量最多。结论 KGN不能明显增强SMSCs的增殖能力,但对SMSCs的成软骨分化能力强于TGF-β3/BMP-2/DEX,将来可能应用于修复软骨损伤。

关键词:滑膜间质干细胞细胞增殖细胞分化软骨细胞

单位:上海长征医院关节外科; 上海200003; 第二军医大学组织胚胎教研室

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