摘要：目的 探讨溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）调控脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ASCs）增殖的作用及其分子机制.方法 分离SD大鼠ASCs,利用LPA对其进行干预,干预时间为1h,采用Western Blot检测YES相关蛋白（yes associated protein,YAP）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）蛋白表达水平.利用免疫荧光检测YAP亚细胞定位,逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测CTGF和Ankrd1的mRNA表达水平.慢病毒转染ASCs,Western Blot检测不同分组YAP蛋白表达.进一步利用流式细胞术和CCK-8法检测不同分组中ASCs增殖情况.最后采用RhoA抑制剂C3干预,免疫荧光检测不同分组中YAP亚细胞定位,Western Blot检测YAP、CTGF和GTP-RhoA的表达情况.结果 LPA能显著促进YAP的表达和在细胞核内的聚集,同时LPA也能够促进YAP靶基因CTGF在蛋白水平的表达.LPA能上调YAP靶基因CTGF和锚蛋白重复域1（ankyrin repeating domain 1,Ankrd1）的mRNA表达水平.慢病毒转染敲除YAP表达后,LPA对YAP的上调作用被明显抑制.细胞周期流式细胞术和CCK-8检测结果显示LPA可显著促进ASCs的增殖,但在shYAP慢病毒转染特异性敲除YAP后,LPA对ASCs的促增殖能力被明显削弱.RhoA抑制剂C3处理后,LPA对YAP细胞核聚集的促进作用被削弱,同时LPA对YAP、CTGF和GTP-RhoA表达的促进作用也得到了明显抑制.结论 LPA能够通过RhoA-YAP通路调控ASCs的增殖.

关键词：溶血磷脂酸 脂肪干细胞 细胞增殖 

单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科; 武汉430030