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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因不同编码区的表达和反应原性鉴定

周宏专; 徐福洲; 王金洛; 杨新建; 史爱华; 杨兵 华北农学报 2007年第03期

摘要:为鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)囊膜糖蛋白GP5编码基因ORF5不同编码区的原核表达能力,利用PCR方法分别扩增ORF5基因缺失信号肽的D片段、缺失信号肽和跨膜区的L片段、缺失信号肽的5′端N片段和缺失跨膜区的3′端C片段,经克隆测序后分别插入原核表达载体pET-32a中进行原核表达,结果显示未缺失跨膜区的D片段未见表达产物,而L片段、N片段和C片段分别表达大小约为33,25,29 kDa的融合蛋白。Western blotting检测结果显示L片段表达蛋白可与PRRS阳性血清发生阳性反应,C片段反应性稍弱,而N片段未出现阳性反应,证实ORF5基因编码产物的C端在与抗体结合的反应原性方面具有重要作用。

关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒orf5基因原核表达反应原性跨膜区

单位:首都师范大学生命科学学院; 北京100037; 北京市农林科学院畜牧兽医研究所; 北京100097; 北京农业职业学院; 北京102442

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