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桑树中miR319的克隆及在雄花发育中表达分析

孙志超; 李娜; 谢岩; 杨帆; 高妍夏; 高玉军; 杨贵明; 李季生 核农学报 2019年第08期

摘要:为探究mi R319及靶基因在调控桑树雄花发育的分子机制,本研究通过石蜡切片技术判断桑树雄花芽发育时期及在线网站预测mi R319的靶基因。结果表明,桑树雄花芽发育分为未分化期(A1)、分化初期(A2)、花序分化期(A3)和总苞形成期(A4) 4个不同的阶段;桑树中mi R319家族存在mi R319a、mi R319b和mi R319c 3个成员,其中mi R319b与mi R319c位于同一条前体序列上,预测并获得了mi R319 6个靶基因。运用5’-RACE技术验证了mi R319a的4个靶基因,其切割位点主要集中在与mi RNA互补位点的第10和第11位碱基之间。采用RT-qPCR技术检测mi R319a及靶基因在雄花发育不同阶段的表达水平,发现mi R319a在雄花发育A2-A3阶段表达水平迅速降低,靶基因Morus012208、Morus008229、Morus008100与Morus005893在此阶段表达水平迅速升高,茉莉酸(JA)含量也迅速升高。同时,JA合成关键基因PLDα1和LOX5在雄花发育A2-A3阶段表达上调,表明mi R319通过调控靶基因影响JA合成来调控桑树花序分化。本研究为揭示桑树mi R319在JA途径中调控花发育中的分子调控机制奠定了一定的理论基础。

关键词:桑树雄花发育茉莉酸mir319荧光定量pcr

单位:河北省高校特产蚕桑应用技术研发中心/承德医学院蚕业研究所; 河北承德067000

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