摘要：目的：由于国内目前尚无检测隐匿性乙型肝炎病毒（Occult Hepatitis B Virus;OHBV）感染的试剂盒且OHBV患者的特点是HBsAg阴性,血清中存在低水平的HBV DNA,用常规的检测方法不能检测出来;急需研制灵敏度高、特异性强的PCR方法,来探讨青岛市是否存在OHBV感染.方法 根据OHBV血清图谱的特点随机收集了OHBV可疑样本100份,采用试剂盒和酚/氯仿两种方法提取DNA,PCR扩增及其引物设计按Kanneko等的方法进行并进行了改进.结果 1.经改进的酚/氯仿法提取OHBV DNA优于试剂盒法.2.常规PCR引物组合109-588扩增,所有样品的109-588组合均无扩增产物;使用嵌套式PCR引物组合1763-1778-2017-2032进行扩增,33份样品出现了HBV特异性扩增带.3.在OHBV不同血清图谱样品中均检出OHBV DNA,总检出率为33%,其中anti-HBs＋anti-HBc阳性组中OHBV DNA检出率最高（43.33%）;anti-Hbe＋anti-HBc阳性组中OHBV DNA检出率最低（18.18%）.结论 酚/氯仿法提取OHBV DNA经改良,优于试剂盒法,常规PCR方法不能检测出OHBV DNA,而嵌套式PCR方法可达到诊断OHBV的目的.本实验首次在青岛运用自行设计的OHBV检测体系,在OHBV可疑人群中检测出OHBV DNA,为有针对性地管理OHBV传染源提供了可靠依据和检测方法.

关键词：隐匿性乙型肝炎病毒感染 嵌套式pcr引物 pcr hbv dna 

单位：山东省青岛市传染病医院; 266033; 山东省青岛市疾病预防控制中心; 266033