摘要：目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法，根据提取过程中细胞形态变化，提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度。结果各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显，具备各自特征性的蛋白点分布，各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone H1和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分。细胞骨架蛋白组分中约90％以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白。结论亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性，提取组分选择性较高，并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率，是一种比较理想的进行蛋白质组学研究的样本预处理方法。

关键词：组分蛋白提取 细胞骨架蛋白 双向凝胶电泳 

单位：南方医科大学南方医院检验科 广东广州510515 香港大学李嘉诚医学院解剖系 香港