摘要：研究转运膜蛋白21（TMP21）在小鼠成纤维细胞中超表达状态下。对γ分泌酶活性的影响．利用TMP21eDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系（MEF（KO）），以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞．处理超表达组（T）和对照组（C）细胞，并收集纯化含γ分泌酶复合物的样本．用Western blotting检测TMP21蛋白表达量，选用饱和浓度的γ分泌酶底物C99，运用ELISA检测Aβ-peptide40和AIβ-peptide42的生成总量．结果表明，样本T1、T2及IPT2所含TMP21的蛋白表达量较相应对照组样本C1、C2和IPC2分别上升11．5％（P=0．08），28．1％（P〈0．01），69．1％（P〈0．001），提示经TMP21eDNA转染后MEF（K0）细胞中TMP21蛋白表达明显提高．同时，对照样本C1、C2及IPC2，样本T1、T2及IPT2中所含γ分泌酶活性分别降低33．4%（P=0．01），71．9％（P〈0．001），96．5％（P〈0．001）．转染组样本中，样本IPT2所含γ分泌酶活性最低．提示经处理γ分泌酶得到明显纯化分离，与Western blotting所得结果一致．因此，高表达状态下的TMP21蛋白，对MEF（KO）细胞中γ分泌酶的活性具有明显的降低作用．表明TMP21为γ分泌酶的负调控因子之一．

关键词：脱氧核糖核酸超表达 转运膜蛋白21 酶联免疫反应 免疫印迹反应 

单位：内蒙古大学生命科学学院 内蒙古呼和浩特010021 内蒙古科技大学包头师范学院 内蒙古包头014030 内蒙古农业大学动物科学与医学学院 内蒙古呼和浩特010018