摘要：根据基因库中小鼠生长分化因子-5（GDF-5）序列设计并合成引物，提取孕14d小鼠胚胎肢芽组织总RNA，行RT—PCR扩增，将扩增产物GDF-5基因片断插入至pcDNA3．1（＋）载体并转化大肠杆菌DH5α，提取重组质粒，酶切鉴定及测序。结果：DNA琼脂糖凝胶电泳和双酶切均显示出一长约1603bp的带；测序结果与基因库中的序列完全相同。认为重组小鼠pcDNA3．1（＋）／GDF-5真核表达质粒构建成功，为进一步研究其在软骨发育中的作用奠定了基础。

关键词：小鼠 克隆 质粒 

单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院; 湖北武汉430022