摘要：目的探讨快速、准确检测真菌性角膜病常见致病菌的方法。方法将临床上常见的角膜致病真菌6属12种经氨基化修饰的特异性寡核苷酸探针固定在醛基化的载玻片上。用一对荧光标记通用引物对上述真菌的DNA基因片断进行扩增，将带有荧光标记的扩增产物与载玻片上排列的探针进行杂交，置于荧光显微镜下观察其显色情况。结果12种真菌都产生了530～630bp的PCR扩增产物，在相同的条件下对其进行杂交检测,得到了具有各自特征的杂交后荧光显色图谱，通过荧光信号可直接对不同菌种进行区分判断。结论采用固相杂交技术能够在3～4h完成对临床上常见的12种角膜致病真菌的菌种检测。

关键词：固相杂交技术 角膜病 真菌 致病菌 菌种检测 

单位：河南省眼科研究所; 河南郑州45003; 河南省生物工程中心