摘要:目的构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)质粒表达载体并进行鉴定。方法设计两个小分子干扰RNA(siRNA)序列,体外合成DNA模板引物,与Pgenesil-1质粒构建成编码shRNA的表达载体,进行酶切鉴定和测序,再转染人大肠癌LoVo细胞,进行荧光摄像和G418抗性筛选。结果构建的质粒表达载体完全符合设计要求,转染成功的细胞在荧光显微镜下显示为绿色,G418可以筛选出阳性克隆。结论成功构建了编码EGFR—shRNA的质粒表达载体,并可以进行稳定筛选。
关键词:表皮生长因子受体 小分子干扰rna 短发卡状rna 质粒载体
单位:宜昌市第二人民医院; 湖北宜昌443000; 华中科技大学同济医学院附属协和医院
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社