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GCSsiRNA载体构建及其对转染人胃癌细胞SGC7901/VCR的作用

张艳; 刘宗文; 刘书漫; 丁一; 张钦宪 山东医药 2007年第10期

摘要:根据siRNA设计原则,针对人葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)mRNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入小干扰RNA表达载体,构建重组质粒。将重组质粒转人耐长春新碱的胃癌细胞株(SGC7901/VCR),通过RT—PCR、免疫细胞化学等方法检测转染细胞GCS的表达水平,以生长曲线观察细胞生长情况。结果构建的GCSsiRNA表达载体释放出的片段与预期结果一致;转染SGC7901/VCR细胞后,可使细胞中GCSmRNA及其蛋白表达受抑制,细胞生长减慢。提示GCSsiRNA载体的成功构建及其对GCS表达和细胞生长的抑制,使其可能成为肿瘤基因治疗的一种新手段。

关键词:rna干扰葡萄糖神经酰胺合成酶表达载体胃肿瘤

单位:郑州大学基础医学院; 河南郑州450052; 河南省肿瘤病理重点实验室

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