摘要：目的为血管内皮生长因子（VEGF165）生物学分子机制的研究奠定基础。方法用RT-PCR法从人胎肝总RNA中逆转录扩增VEGF165，将其插入表达载体pET-32a（＋）Vector中，将测序鉴定正确的重组表达载体转化至E．ColiXL-Blue中表达，并用纯化蛋白刺激人脐静脉内皮细胞，检测其促增殖活性。结果经异丙基硫代．βD-半乳糖苷（WTG）诱导后，VEGF地（His）6得到有效表达，Westernb10t分析可以观察到相对分子质量为26kD的诱导表达条带，该表达蛋白可与VEGF多克隆抗体发生特异性反应。用His-bind亲和层析纯化得到纯度较高的目的蛋白，该蛋白可促进内皮细胞增殖。结论基因工程技术可使大肠杆菌有效表达人VEGF165，并得到纯度较高、有增殖活性的VEGF165蛋白；此为进一步研究VEGF的生物学分子机制奠定了基础。

关键词：vegf165 基因克隆 表达 纯化 增殖 

单位：咸宁学院医学院 湖北咸宁437100