摘要:采用分子克隆技术构建重组质粒人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-PTEN),以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株ZR-75-1中,应用RT-PCR、Western印迹法分析目的基因的表达。双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1.2kb,测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同;RT-PCR、Western印迹显示pEGFP-C1-PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达。成功构建了人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1-PTEN,并将其成功转染入乳腺癌细胞ZR-75-1中,为研究PTEN在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。
关键词:真核表达载体 绿色荧光蛋白 基因转染
单位:吉林大学中日联谊医院 吉林长春130033
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