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Mef2c真核表达载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达

温见燕 于长安 杨鹏 阴彬 李耿 柯元南 廖文强 山东医药 2009年第04期

摘要:目的构建小鼠Mef2c基因真核表达质粒并转染HEK293T细胞。方法采用RT-PCR方法从小鼠心脏组织的总cDNA中扩增出小鼠的Mef2c的基因,采用基因重组技术将Mef2c的cDN段插入真核表达载体peD—NA3.1(+),构建小鼠Mef2c真核表达质粒,脂质体转染HEK293T细胞进行表达。结果酶切和测序结果证实Mef2c真核表达质粒构建成功,经脂质体转染293T细胞后,Western blot检测证明Mef2c蛋白在真核细胞中成功表达。结论成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(+).Mef2c,为进一步研究小鼠Mef2c在心肌分化过程中的作用及其调控机制奠定了实验基础。

关键词:mef2基因表达载体构建

单位:中日友好医院全国中西医结合心血管病中心 北京100029 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

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