摘要：目的构建针对细胞凋亡基因FasL的小干扰RNA（siRNA）表达载体，探讨载体介导的RNA干扰技术用于肺间质纤维化基因治疗的可行性。方法依据siRNA靶序列的设计原则，以FasL mRNA为靶基因，合成两对编码短发卡结构的两条DNA序列，经退火合成DNA双链，再克隆至siRNA表达载体pSilencer2．0中，转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定。将构建的载体用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株，采用实时荧光定量PCR法检测细胞FasL mRNA水平变化。结果成功构建发卡样FasL siRNA真核表达载体；其转染人肺腺癌A549细胞后，细胞FasL mRNA的表达水平显著下降。结论FasL siRNA真核表达载体能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasL mRNA的表达；本研究为肺间质纤维化的基因治疗奠定了基础。

关键词：fasl基因 rna干扰 表达载体 

单位：郑州大学第一附属医院 河南郑州450052 郑州大学基础医学院