摘要：目的构建稳定表达人GL50基因的小鼠成纤维母细胞L929细胞株，探讨GL50信号通路对T细胞的共刺激效应。方法Trizol一步法抽提人扁桃体细胞RNA，RT—PCR法扩增出GL50基因，双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ—Term，与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T，用其培养上清感染L929细胞72h，经Zeoein筛选出稳定表达GL50分子的1929细胞株；采用’It—TdR掺入实验观察GL50信号对T细胞体外培养的共刺激作用。结果成功构建含GIS0基因的重组逆转录病毒载体，并获得含有GL50基因的重组病毒，筛选获得能稳定高表达人GL50分子的L929转基因细胞；该转基因细胞对体外培养的T细胞具有促增殖和活化作用；同时，GL50／ICOS信号与CD28／B7信号具有协同作用。结论GL50／ICOS信号在机体免疫应答过程中起重要作用；GL50转基因细胞的成功构建为进一步研究GL50分子功能奠定了良好基础。

关键词：gl50基因 逆转录病毒 稳定表达 增殖 

单位：苏州农业职业技术学院 江苏苏州215008 苏州大学医学生物技术研究所