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FAK基因靶向miRNA表达质粒的构建及鉴定

刘启胜 董卫国 于红刚 山东医药 2010年第07期

摘要:目的构建靶向黏着酶(FAK)基因的miRNA真核表达质粒,为其在胃癌相关研究中的应用奠定基础。方法设计合成两条针对FAK基因的特异性miRNA干扰序列,定向克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP—miR真核表达载体上,经鉴定后转染胃癌BGC-823细胞,实时定量PCR及Western—blot技术鉴定重组体对细胞FAK基因表达的干扰效果。结果针对FAK基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,转染BGC-823细胞后,细胞FAKmRNA及FAK蛋白表达均明显降低。结论针对FAK基因的miRNA真核表达质粒成功构建,该质粒可用于miRNA进行靶向FAK的相关研究。

关键词:fak基因微小rnarna干扰

单位:武汉大学人民医院 武汉430060

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