摘要：目的观察β-微管蛋白Ⅲ（TUBB3）反义寡核苷酸（ASODN）对食管鳞癌紫杉醇耐药细胞Ec9706/P-1耐药性的影响,并探讨其机制。方法将EC9706/P-1细胞分为A、B、C组,A组不作处理,B、C组分别加入无义寡核苷酸（NSODN）、TUBB3-ASODN转染24 h,加入100、10、1、0.1、0.001μg/ml的紫杉醇培养24 h。采用MTT法测算各组紫杉醇半数抑制浓度（IC50）及细胞耐药指数（RI）,采用流式细胞仪检测细胞周期,采用RT-PCR和免疫组化法检测TUBB3 mRNA及其蛋白。结果C组紫彬醇IC50为（7.78±1.15）μg/ml、RI为3.37,B组分别为（16.56±1.80）μg/ml、7.17,A组分别为（15.40±2.06）μg/ml、6.67,C组与A、B组相比,P均〈0.05。C组G0＋G1期细胞百分比为78.7%±2.3%,S期为14.3%±2.1%,G2＋M期为7.0%±0.9%;B组分别为87.3%±1.2%、6.9%±0.4%、5.8%±0.8%,A组分别为85.9%±1.1%、7.5%±0.5%、6.7%±0.9%,C组G0＋G1期、S期细胞百分比与A、B组比较,P均〈0.05。C组TUBB3蛋白阳性率为33.68%±8.34%、TUBB3 mRNA为1.33±0.08,B组分别为62.96%±10.49%、1.59±0.06,A组分别为64.47%±11.75%、1.60±0.10,C组与A、B组相比,P均〈0.05。结论TUBB3-ASOND可增加Ec9706/P-1对紫杉醇的敏感性,TUBB3升高可能是食管鳞癌对紫杉醇产生耐药的机制之一。

关键词：反义寡核苷酸 食管肿瘤 鳞状细胞癌 紫杉醇 细胞耐药 

单位：河南大学淮河医院 河南开封475001 郑州大学第一附属医院