摘要：目的构建基质金属蛋白酶2（MMP-2）靶向的RNA干扰（RNAi）质粒,观察其对小鼠巨噬细胞MMP-2基因表达的沉默作用。方法设计能转录小发卡结构RNA的DNA序列,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达质粒psiSTRIKETM-MMP-2;将此质粒导入小鼠巨噬细胞内,采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测小鼠巨噬细胞中的MMP-2 mRNA及蛋白表达。结果重组质粒psiSTRIKETM-MMP-2用限制性PstⅠ内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳中可清楚地看到重组载体被切为2个片断,证明重组质粒构建成功。将其转染小鼠巨噬细胞后,MMP-2 mRNA及蛋白表达下调。结论成功构建了MMP-2靶向RNAi质粒,其能明显抑制小鼠巨噬细胞MMP-2 mRNA及蛋白的表达。

关键词：基质金属蛋白酶 rna干扰 肺纤维化 

单位：哈尔滨医科大学第一临床医学院 哈尔滨150001