摘要:目的观察RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白(Paxillin)表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA(shRNA)表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA及蛋白。结果根据针对Paxillin基因设计了小干扰RNA(siRNA)序列,构建了shRNA表达载体,并成功转染至HCT-8细胞。以空白对照组作均一化,转染Paxillin-shRNA_1、Paxillin-shRNA_2、Paxillin-shRNA_3、Paxillin-shRNA_NC的细胞及空白对照组细胞Paxillin mRNA相对表达量分别为0.66±0.28、0.31±0.11、1.00±0.22、1.05±0.32、1.00±0.29,Paxillin蛋白相对表达量分别为0.62±0.11、0.39±0.13、0.74±0.21、0.94±0.09、1.00±0.16。结论 RNAi可沉默结肠癌HCT-8细胞Paxillin的表达。
关键词:rna干扰 短发卡rna 小干扰rna 结肠癌细胞 桩蛋白
单位:南通大学附属医院 江苏南通226001 百奥迈科生物技术有限公司
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