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干扰CDC25A基因对CNE2细胞连续照射期间增殖的影响

曲颂 朱小东 李相德 李龄 黎丹戎 张玮 山东医药 2011年第01期

摘要:目的 采用RNA干扰技术沉默CDC25A基因,观察其对鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)在连续照射中后期加速增殖现象的影响。方法构建、培养出CDC25A基因沉默效果稳定的CNE2-psilence4.1-CDC25A,接受射线2Gy/d连续照射5d,分别采用MTT法、流式细胞术检测细胞的生长增殖活性,并在mRNA及蛋白水平上应用RT—PCR、WesternBlot法进行验证。结果MTT法检测结果表明,CNE2-psilence4.1-CDC25A细胞存活分数(SF)在第5天达到高峰,CNE2-psilencc4.1-Control细胞SF在第3天达到高峰。流式细胞术检测结果显示,CNE2-psilenee-4.1-CDC25A细胞在照射第5天S期细胞比(SPF)及增殖指数(PI)为最高值,CNE2-psilence4.1-Control细胞在照射第3天SPF值最高,在照射第4天PI值最高;RT-PCR、WesternBlot法进一步验证CNE2-psilence4.1-CDC25A细胞在照射第1、3、5天的CDC25A的表达与MTT法、流式细胞术检测结果基本吻合。结论与CNE2-psilencer4.1-Comrol细胞相比,基因沉默的CNE2-psileneer4.1-CDC25A细胞在连续分割照射期间,细胞的生长速度减慢、生长高峰延迟。

关键词:rna干扰cdc25a加速再增殖

单位:广西医科大学附属肿瘤医院 南宁530021

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