摘要：目的 构建真核表达载体plRES2-EGFP／TRAIL和pinES2-EGFP／CD，为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础。方法将pCMV／CD质粒和pcDNA3．1（＋）／TRAIL质粒行琼脂糖凝胶电泳检测，确定其完整性，并进行序列测定确定有无基因突变。pCMV／CD质粒用SacⅡ／XhoⅠ双酶切，pcDNA3．1（＋）TRAIL质粒用BamHⅠ／XhoⅠ双酶切，将目的基因定向克隆到真核细胞表达载体plRES2-EGFP中，转化E．coliDH5α感受态细胞，通过限制性内切酶双酶切、PCR及核酸序列分析等筛选、鉴定重组质粒。结果所构建的真核表达载体plRES2-EGFP／TRAIL经SacⅡ／XhoⅠ双酶切回收片段分别为1．0、5．2kb；plRES2-EGFP／CD经BamHⅠ／XhoⅠ双酶切回收片段分别为1．3、5．2kb。PCR及测序证实，plRES2-EGFP／TRAIL和plRES2-EGFP／CD质粒基因组中分别包含TRAIL和CD基因。结论成功构建了真核表达载体plRES2-EGFP／TRAIL和plRES2-EGFP／CD，为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用奠定了基础。

关键词：真核表达载体 

单位：广州医学院第二附属医院神经科学研究所 广州510260