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携带Foxp3基因慢病毒载体的构建

陈春 李永翔 罗庆礼 山东医药 2011年第26期

摘要:目的构建携带叉头样转录因子p3(Foxp3)基因的重组慢病毒载体PWPXL-MOD-Foxp3,并包装成慢病毒,为体外获得CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5 Tregs)奠定基础。方法采用双酶切法构建慢病毒表达载体PWPXL-MOD-Foxp3,用磷酸钙沉淀法将包装慢病毒所需的四质粒系统共转染人胚肾细胞293T,慢病毒系统转染48h后收集病毒上清液,纯化、浓缩后采用流式细胞术测定慢病毒滴度。结果重组的慢病毒载体滴度为3.3×108IU/ml。结论成功构建了含有Foxp3基因的高滴度的慢病毒载体,为体外获得CD 4+CD 2+5 Tregs奠定基础。

关键词:叉头样转录因子p3基因慢病毒基因治疗

单位:安徽医科大学第一附属医院 合肥230032 安徽医科大学教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室

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