摘要：目的构建靶向AKT基因的miRNA真核表达载体，观察其转染胃癌BGC-823细胞后对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。方法设计并合成两条针对AKT基因的特异性miRNA干扰序列，与载体pcDNATM6．2-GW／EmGFP—miR连接，转化大肠杆菌，纯化并鉴定后转染BGC-823细胞，实时定量PCR及Westernblot技术鉴定重组体对AKT基因表达的干扰效果。使用M1Tr法检测细胞增殖能力，Transwell法检测细胞的侵袭能力。结果针对AKT基因的miRNA干扰质粒构建成功，BGC-825细胞转染该质粒后AKTmRNA及AKT蛋白表达明显受抑制，细胞增殖和侵袭能力均显著下降（P均〈0．05）。结论AKT靶向miRNA真核表达载体构建成功；其可有效抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力。

关键词：akt基因 microrna rna干扰 增殖 侵袭 

单位：咸宁市中心医院 湖北咸宁437100 武汉大学人民医院