摘要:目的观察转染趋化因子受体CXCR4的人支气管上皮细胞HBE向趋化因子SDF-1的定向迁移情况。方法免疫荧光和流式细胞仪检测正常HBE细胞中的CXCR4蛋白。构建CXCR4慢病毒表达载体并转染HBE细胞。实时荧光定量PCR和Western blot检测转染CXCR4的HBE细胞中的CXCR4 mRNA和蛋白,通过Transwell小室实验观察该细胞向SDF-1的定向迁移情况。结果正常HBE细胞的CXCR4蛋白表达量较低。成功构建了CXCR4慢病毒表达载体。转染CXCR4的HBE细胞中CXCR4 mRNA和蛋白都有较高水平的表达,且向SDF-1定向迁移的细胞数[SDF-1终浓度分别为1、3、10、30、100、300 nM时到达膜背面的细胞分别为(42.8±2.8)(、47.6±6.2)(、57.8±3.3)(、62.4±5.0)(、89.8±4.7)(、100.0±4.8)(、62.4±5.0)个]较未加入SDF-1时的细胞数([32.8±2.2)个]显著增加(P均〈0.05),并呈浓度依赖性(P〈0.05)。结论转染趋化因子受体CXCR4的HBE细胞向趋化因子SDF-1的定向迁移明显增加。
关键词:趋化因子受体 cxcr4基因 趋化因子 支气管上皮细胞 趋化作用
单位:中国医科大学附属盛京医院 沈阳110004
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