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CXCR4-shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定

陆航 孙巨峰 刘学政 山东医药 2011年第46期

摘要:目的选择性构建CXC趋化因子受体4(CXCR4)的特异RNA干扰载体。方法在GenBank中获取CXCR4基因的核苷酸序列,设计并合成3条短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,并克隆到PL—Dest腺病毒骨架载体(shpAd/PL—Dest)中,组成人趋化因子受体重组腺病毒基因沉默子(shpAd—hCXCR4-eGFP),采用酶切、PCR和DNA测序方法验证。将验证后3种沉默子经酶切后转染至HEK293A细胞包装病毒,得到CXCR4的腺病毒表达载体。结果构建的shRNA—Ad—hCXCR4-eGFP3种基因沉默子序列正确并成功克隆到腺病毒表达载体上。结论成功构建CXCR4-shRNA腺病毒表达载体。

关键词:cxc趋化因子受体4rna干扰重组腺病毒载体人胚肾293a细胞

单位:广西医科大学人体解剖学教研室 南宁530021 辽宁医学院附属第一医院

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