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百日咳鲍特菌BP283基因的实时荧光定量PCR检测方法的建立

罗炜 王慧 刘利东 任筱兰 赖克方 山东医药 2012年第03期

摘要:目的探讨检测百日咳鲍特菌BP283基因片段的有效方法。方法以百日咳鲍特菌BP283序列为目的基因,设计探针和引物,构建质粒标准品;建立FQ-PCR体系,优化反应条件,并进行方法学评价。结果成功构建了重组质粒pCR2.1-BP283;建立了检测BP283基因片段的FQ—PCR方法:标准曲线相关系数为0.998,最低检测浓度为10^2copies/μL,对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线,批内及批间变异系数均〈4%。结论FQ—PCR方法可成功检测百日咳鲍特菌BP283基因,该方法具有敏感性好、特异性高及重复性好等优点。

关键词:百日咳鲍特菌实时荧光定量bp283基因

单位:广州医学院第一附属医院 广州510120

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