摘要：目的体外获得表达重组大鼠GATA4-pEGFP基因的骨髓间充质干细胞（MSCs）,为进一步研究后者在心肌梗死治疗中的作用奠定基础。方法提取胎鼠心肌细胞总RNA,RT-PCR法扩增获得GATA4基因,将目的基因克隆到pEGFP-N3载体并获得重组后GATA4-pEGFP质粒,采用密度梯度离心法联合贴壁法分离骨髓单个核细胞并获得MSCs。将重组质粒GATA4-pEGFP以Lipo2000转染到大鼠MSCs,G418筛选2周,Western blot和荧光检测重组质粒在MSCs中的表达情况。结果成功构建重组大鼠GATA4-pEGFP真核表达载体并转染入MSCs中,Western blot和荧光检测证实GATA4-pEGFP基因在MSCs中呈阳性表达。结论成功建立表达大鼠GATA4-pEGFP基因的MSCs,此为利用组织工程学方法治疗心肌梗死的研究奠定了基础。

关键词：骨髓间充质干细胞 gata4基因 增强型绿色荧光蛋白 

单位：吉林医药学院病理学教研室 吉林吉林132013