摘要:目的观察核转录子κB(NF-κB)decoy寡核苷酸(ODNs)转染对结肠癌细胞NF-κBDNA结合活性的影响。方法将体外培养的人结肠癌SW480细胞随机分为5组。对照组:不作处理;脂多糖(LPS)组:LPS刺激3h;NODN组:LPS刺激3h后转染NF-κBdecoyODNs6h;SODN组:LPS刺激3h后转染ScrambledODNs6h;Lipo-fectamine2000组:LPS刺激3h后加入同等剂量Lipofectamine20006h。之后提取各组细胞核蛋白,用Westernblot法检测NF.KBp65,用TransAM法检测细胞核NF-κBp65的DNA结合活性(用吸光度值,即A值表示)。结果细胞核中NF-κBp65的相对含量在对照组为10.1%±3.2%、LPS组为91.3%±17.8%、NODN组为86.5%±13.4%、SODN组为90.2%±14.9%、Lipofectamine2000组为89.7%±15.1%;LPS组、NODN组、SODN组、Lipo-fectamine2000组与对照组相比,P均〈0.01。细胞核NF-κBp65的DNA结合活性(A值)在对照组为0.124-4-0.210、LPS组为1.547±0.110、NODN组为0.327±0.053、SODN组为1.509±0.172、Lipofeetamine2000组为1.497±0.167;LPS组、NODN组、SODN组、Lipofectamine2000组与对照组相比,P均〈0.01;NODN组与LPs组、SODN组、Lipofectamine2000组相比,P均〈0.0l;SODN组与Lipofectamine2000组相比,P〉0.05。结论用NF-κBdecoy寡核苷酸干预,可以明显抑制结肠癌细胞NF—KB065的DNA结合活性。
关键词:寡核苷酸 sw480细胞
单位:河北医科大学第二医院 石家庄050000 河北医科大学
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