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靶向UCP-2基因siRNA慢病毒转染对胰腺腺泡细胞AR42J坏死、凋亡的影响及机制探讨

程锐 蔡欣然 周浩辉 韩圣华 朱金海 陈燕凌 山东医药 2012年第14期

摘要:目的观察靶向解偶联蛋白2(UCP-2)基因小干扰RNA(siRNA)慢病毒转染对胰腺腺泡细胞AR42J坏死、凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法构建靶向UCP-2基因siRNA慢病毒载体,转染AR42J细胞(实验组),并设立阴性对照组及空白对照组。荧光显微镜镜检确定感染效率,实时定量PCR检测各组细胞的UCP-2mRNA。以1×10^8 mol/L的蛙皮素刺激AR42J细胞,采用AnnexinV/PI双标流式细胞仪检测蛙皮素刺激后不同时间点AR42J细胞的坏死率和凋亡率,同时检测细胞内的ATP、活性氧簇(ROS)。结果成功构建了滴度为5X10。TU/mL的UCP-2基因siRNA慢病毒载体;实验组细胞UCP-2mRNA表达明显降低,各时间点AR42J细胞凋亡率及其ROS、ATP水平显著高于阴性对照组(P均〈0.05),细胞坏死率则显著低于阴性对照组(P〈0.05)。结论靶向UCP-2基因siRNA慢病毒转染可抑制AR42J细胞的UCP-2基因表达,促进细胞凋亡,抑制细胞坏死,其作用机制与其增加AR42J细胞内ROS、ATP表达有关。

关键词:细胞坏死细胞调亡rna干扰胰腺炎

单位:福建医科大学附属协和医院 福州350001

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