摘要：目的构建凋亡素VP3蛋白的原核表达质粒，并进行诱导表达和蛋白纯化。方法采用PCR法自PGEX-6P．1／TAT．VP3质粒中扩增VP3基因，运用靶向克隆酶将VP3基因插入线性pETl5b，构建重组表达质粒pET．15b．VP3；经测序证实构建成功后转化E．coliRosetta，表达凋亡素VP3蛋白；经Ni-NTA树脂亲和层析，对纯化产物进行SDS．PAGE、Westernblotting分析鉴定。结果成功构建凋亡素VP3蛋白原核表达质粒，表达并纯化了分子量为13．6kD的凋亡素VP3蛋白。结论凋亡素VP蛋白原核表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化，为体内应用凋亡素VP3蛋白进行抗肿瘤研究奠定了基础。

关键词：凋亡素 vp3 分离 提纯 

单位：湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心 湖北十堰442000 武汉市中心医院 湖北医药学院免疫教研室