摘要：目的构建弓形虫微线体蛋白（MIC3）的真核表达质粒，为进一步研究MIC3蛋白的功能奠定基础。方法PCR法扩增弓形虫MIC3目的基因，将纯化的目的基因插入到真核表达质粒PCDNA3．0，并转入DH5α宿主菌中，在含有青霉素的SOB平板上筛选阳性重组子，采用酶切和PCR扩增法对重组质粒进行鉴定；应用HifectinⅡ真核细胞转染试剂将弓形虫PCDNA—MIC3真核表达质粒转染幼地鼠肾细胞（BHK），表达产物用SDS—PAGE进一步确认，ELISA法检测表达蛋白的免疫原性。结果重组质粒PCDNA—MIC3经单双酶切及PCR扩增都得到以原插入片段MIC3基因1120bp大小相同的片段，PCDNA—MIC3能在BHK细胞中高效表达，表达产物能被弓形虫特异性血清所识别。结论成功构建了弓形虫MIC3基因真核表达质粒PCDNA—MIC3。

关键词：弓形虫微线体蛋白 真核表达质粒 

单位：贵州省疾病预防控制中心 贵阳550040