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等位基因特异性PCR技术在5-脂氧合酶基因多态性检测中的应用

白春英 史铁伟 瑞云 于晓明 张朝军 仝丽娟 李秀君 高丽枫 周静 山东医药 2012年第31期

摘要:目的探讨等位基因特异性PCR技术检测5-脂氧合酶基因六个位点的单核苷酸多态性(SNP)的效果。方法采集36例哮喘患者外周静脉血2mL,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,采用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,采用等位基因特异性PCR(AS—PCR)法直接对已知位点的SNP进行扩增分型。针对野生型和突变型设计3’端的碱基,且倒数第二位的碱基设计故意错配的碱基,用以提高引物的特异性。结果5.脂氧合酶六个位点的SNP检测结果准确清晰。结论采用本研究设计的引物可以对5-脂氧合酶的六个位点直接扩增分型;与测序法和限制性内切酶酶切法相比,等位基因特异性PCR技术检测5-脂氧合酶六个位点的SNP具有经济、快速、简便、易行等特点。

关键词:等位基因特异性pcr单核苷酸多态性

单位:赤峰学院医学院 内蒙古赤峰024000 赤峰学院第一附属医院

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