摘要：目的 构建真核表达载体pcDNA3．1（＋）-miR-205，并使其在。肾上腺皮质癌细胞SW-13中稳定表达。方法依据miRbase数据库中pre—miR-205序列设计引物，PCR扩增pre—miR-205基因并将其克隆至线性化的pcD。NA3．1（＋）质粒中，获得重组表达载体pcDNA3．1（＋）．miR．205，经双酶切及测序分析后，将其及对照空载体转染肾上腺皮质癌SW-13细胞，采用实时定量RCR法鉴定miR-205在SW-13细胞中表达。结果酶切和测序结果均证实pcDNA3．1（＋）-205重组质粒构建成功，经实时定量RCR检测表明转染pcDNA3．1（＋）-205的SW．13细胞中miR-205阳性高表达。结论真核表达载体pcDNA3．1（＋）-205在SW．13中稳定转染，为进一步研究miR-205在肾上腺皮质癌细胞SW-13中的功能及基因调控机制奠定了实验基础。

关键词：肾上腺皮质肿瘤 微小rna 真核表达载体 

单位：南方医科大学研究生学院 广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科研究所