摘要：目的 观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合5-Fu治疗结肠癌的增殖抑制作用,并探讨其机制.方法 将结肠癌细胞株CT26消化处理成3×104/mL的悬液,接种于96孔板中,分为4组.TRAIL组分别加入5、10、50、100、200 ng/mL的TRAIL;5-Fu组分别加入5、10、15、20、25 μg/mL的5-Fu;联合用药组加入5、50、200ng/mL的TRAIL和5-Fu 10 μg/mL;对照组加入5、50、200 ng/mL TRAIL.分别培养24、48、72 h.MTT法检测CT26细胞增殖的抑制率;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Western-blot法检测周期相关基因p21WAFI和p27的表达;免疫组化法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达.结果 TRAIL、5-Fu单药应用能够抑制CT26细胞增殖,且CT26细胞增殖抑制率与5-Fu浓度呈负相关关系.联合组CT26细胞的增殖抑制率高于余3组.与对照组相比,联合组G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例明显下降(P均＜0.05),且联合组内,随着TRAIL浓度升高,G0/G1期细胞比例增加(P＜0.05).相比于对照组,联合组随TRAIL作用浓度提高,CT26细胞凋亡率逐渐上升(P＜0.05).与对照组、5-Fu组比较,联合组p21WAF1、p27蛋白的表达量明显增加,且随着TRAIL作用浓度升高而增加(P均＜0.05).联合组与对照组、5-Fu组相比,Bax蛋白的表达量增加,Bcl-2蛋白表达量减少(P均＜0.05).结论 TRAIL与5-Fu联合使用可抑制结肠癌CT26细胞凋亡,两药联用具有协同抗肿瘤作用,可能与上调p21 WAF1、p27、Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达有关.

关键词：结肠肿瘤 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 细胞凋亡 

单位：徐州医学院附属第三医院 江苏徐州 221003 徐州医学院附属医院