摘要：目的 构建能抑制HBVm RNA表达的siRNA-重组腺相关病毒(rAAV)表达载体,观察重组病毒对HBV的抑制作用.方法 将设计好的siRNA克隆到骨架质粒pAAV-MC中,将该质粒与pAAV-RC和pHelper质粒共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装.收获并纯化病毒,感染模型细胞HepG2.215,采用ELISA法和荧光定量PCR法检测包装的rAAV-shRNA-GFP病毒抑制HBV情况.结果 经酶切及测序证实,rAAV载体质粒pAAV-shR-NA-GFP构建成功,包装的rAAV-shRNA-GFP病毒感染HepG2.215细胞后,可以抑制HBsAg、HBeAg的表达和HBV的复制.结论 成功制备出rAAV-shRNA-GFP病毒,其能够抑制HBV的表达和复制.

关键词：腺相关病毒2 rna干扰 正嗜肝dna病毒属 基因疗法 

单位：贵阳医学院检验系 贵阳 550004 北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室