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HIF-1α对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制探讨

方明 康乐 陈英杰 刘健 陶雅军 山东医药 2013年第40期

摘要:目的 观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,并探讨其可能的机制.方法 构建并筛选HIF-1 α基因的RNAi表达质粒,以脂质体LipofectamineTM 2000介导转染MCF-7细胞.转染后48h,采用实时定量RT-PCR技术检测转染细胞中HIF-1α mRNA的转录水平,筛选有效的HIF-1 αRNAi质粒;CCK-8法比较转染前后乳腺癌细胞增殖变化,实时定量RT-PCR检测顺滑蛋白(SMO)mRNA表达.结果 成功构建含HIF-1α短发夹状RNA(shRNA)1~4的RNAi表达质粒,其中HIF-1 αshRNA-4干扰抑制效率为74%,干扰效果最强(P均<0.05).HIF-1 αshRNA-4干扰48、72、96 h后,MCF-7细胞的生长抑制率明显升高(P均<0.05).HIF-1αshRNA-4转染后MCF-7细胞SMO mRNA的相对表达量为0.56 ±0.06,低于转染前的1.07 ±0.16(P <0.05).结论 HIF-1α表达可促进乳腺癌细胞增殖,可能与其参与调控SMO的表达有关.

关键词:乳腺癌短发夹rna顺滑蛋白

单位:大连医科大学附属第一医院 辽宁大连116001 大连大学医学院

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