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BCL11A-siRNA对HEK293细胞增殖的影响

高杨军 胡小毛 吴红 何冬梅 赵军 李扬秋 山东医药 2014年第03期

摘要:目的设计靶向B细胞淋巴瘤/白血病11A基因的小干扰RNA(BCLllA-siRNA),并观察其对人胚胎肾细胞株HEK293细胞增殖的影响。方法利用siRNATargetFinder工具,针对BCLllA设计合成siRNA319、siRNA585、siRNA2292、siRNA475。将HEK293细胞接种不含抗生素的培养基中,分为阳性对照组(Pc组)、阴性对照组(NC组)、BCLllA-siRNA319组(si319组)、BCLllA-siRNA585组(si585组)、BCLllA-siRNA2292组(si2292组)、BCLllA-siR-NA475组(si475组)、空转组、细胞组。通过Lipofectamine^TM2000,si319组将siRNA319、si585组将siRNA585、si2292组将siRNA2292、si475组将siRNA475分别转染HEK293细胞;转染后6h倒置荧光显微镜观察细胞转染情况并用流式细胞仪检测转染效率;转染后24、48、72h,采用实时定量RT—PCR法观察BCLllA-siRNA对BCLllA基因表达的影响;CEK8法观察HEK293细胞体外增殖情况。结果转染后24h,si585组、si2292组的HEK293细胞BCLllA基因表达降低,72h逐渐恢复;si585组、si2292组细胞增殖受抑,与NC组、空转组、细胞组相比,P均〈0.05。结论BCLlIA.siRNA585及BCLllA.siRNA2292可降低HEK293细胞中BCLllA基因表达,抑制细胞增殖。

关键词:bcllla基因小干扰rnahek293细胞细胞增殖

单位:暨南大学医学院血液病研究所 广州510632 长治市人民医院 暨南大学再生医学重点实验室

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