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DMRIE-C脂质体介导CLEC2B转染Jurkat细胞及其转染率的影响因素

柳君如 张峻岭 徐士福 程琳 山东医药 2014年第09期

摘要:目的探讨由DMRIE-C脂质体介导将CLEC2B siRNA转染入Jrukat细胞的过程中,对Jurkat细胞的影响,并分析其转染率的影响因素。方法通过DMRIE-C转染CLEC2B siRNA入Jrukat细胞,台盼蓝染色法观察细胞活性,流式细胞仪检测siRNA转染率,RT-PCR检测CLEC2B基因沉默效率。结果 DMRIE-C脂质体对细胞的损伤程度与两者比例相关,对转染体系600μL(其中200μL密度为2×106/mL淋巴细胞)进行转染时,脂质体达3μL时可损伤细胞,不利于后续试验进行;siRNA∶DMRIE-C比例为3μL∶2μL,siRNA终浓度约80 nmol/L时,转染率最高,可达30.7%,转染后CLEC2B基因抑制率可达(35±1.9)%(t=15.9,P〈0.05)。结论 DMRIE-C脂质体可实现目的 siRNA对Jurkat细胞有效转染,同时转染中脂质体与细胞比例、血清、操作方式等因素均可对转染效率产生一定的影响。

关键词:脂质体小干扰rnajurkat细胞

单位:中国人民解放军第404中心医院 山东威海264200 天津市中医药研究院附属医院 浙江大学医学院附属儿童医院 石家庄市妇幼保健院

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