摘要：目的构建Raf激酶抑制蛋白（RKIP）小干扰RNA（siRNA）重组质粒pGPHl-绿色荧光蛋白（GFP）-RKIP，观察其对白血病细胞株CCRF-CEM化疗敏感性的影响。方法构建RKIP的siRNA重组质粒pGPHl-GFP-RKIP，电穿孔转染至儿童白血病细胞CCRF—CEM，以Westernblot法检测细胞RKIP、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（P．ERK）、磷酸化核因子KB抑制蛋白（p-IKB）；以不同浓度9-硝基喜树碱（9NC）处理上述细胞，Westernblotting法检测细胞RKIP，流式细胞仪法检测细胞caspase-3活性（计算细胞凋亡率），同上检测RKIP表达。结果成功构建pG．PHl-GFP-RKIP；pGPHl-GFP-RKIP和pGPHl-GFP的转染效率分别为90．04％、91．32％；与pGPHI．GFP转染的细胞比较，pGPHl-GFP-RKIP转染的细胞RKIP表达下调，p-ERK、P—IKB表达上调（P均〈0．05）；9NC处理后CCRF-CEM细胞RKIP表达上调、细胞凋亡率下降（P均〈0．05）。结论成功构建了RKIP的siRNA质组质粒，RKIP表达变化可能与白血病细胞化疗敏感性有关。

关键词：raf激酶抑制蛋白 rna干扰 儿童白血病 44疗敏感性 

单位：武警兵团指挥部医院 乌鲁木齐830063 新疆医科大学第一附属医院