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DKK1基因干扰对原发性肝细胞癌细胞增殖的影响及其机制探讨

边立忠 高松 山东医药 2014年第28期

摘要:目的:观察腺病毒介导的特异性抑制DKK1( shDKK1)基因对原发性肝细胞癌( HCC)细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法设计合成3对DKK1基因的shRNA,筛选出最佳干扰片段,构建腺病毒载体Ad5.shDKK1。取对数生长期的人HCC细胞株SMMC-7721,分别转染Ad5.shDKK1(转染组)和Ad5.shCON(空载组)。采用MTT法检测细胞转染后24、48、72、96 h的相对增殖活力,采用Western blot法检测细胞Wnt信号通路中的β-链蛋白(β-catenin)、C-Myc、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)。结果转染组转染后24、48、72、96 h的细胞相对增殖活力分别为133.65%±11.30%、169.41%±4.64%、251.39%±13.86%、336.70%±16.62%,空载组分别为94.65%±1.77%、98.01%±3.28%、93.80%±2.26%、93.41%±2.22%;两组同时间点比较,P均<0.01。转染组β-catenin、C-Myc、Cyclin D1、PCNA 分别为568.59%±25.36%、351.26%±13.43%、295.35%±45.56%、125.35%±23.61%,空载组分别为102.23%±4.53%、98.65%±7.89%、101.35%±9.23%、97.65%±6.87%,P均<0.05。结论腺病毒介导的shDKK1基因能促进HCC细胞增殖,可能与激活Wnt信号通路有关。

关键词:肝肿瘤dkk1shrna腺病毒

单位:淄博市齐都医院 山东淄博255400 青岛市即墨疾病控制中心

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