摘要：目的：观察柯萨奇病毒-腺病毒受体（CAR）siRNA对睾丸支持细胞上皮屏障通透性的影响，并探讨其机制。方法采用睾丸支持细胞原代双室培养方法制备睾丸支持细胞上皮屏障，细胞培养3 d后分为CAR siRNA组、对照组，分别转染CAR siRNA、无同源性非靶向双链RNA。转染后第2天，分别采用RT-PCR和Western blotting法检测睾丸支持细胞中CAR mRNA、蛋白表达；采用Millicell-ERS电阻系统测量双室模型内外室的电位差；采用免疫荧光细胞化学染色法检测支持细胞的Occludin蛋白，荧光显微镜下观察Occludin分布情况；采用Western blotting法检测支持细胞中总Occludin蛋白量、与早期内涵体抗原1（EEA1）抗体结合的Occludin蛋白。结果 CAR siRNA组与对照组CAR mRNA相对表达量分别为0．122±0．013、0．429±0．039，CAR 蛋白相对表达量分别为0．142±0．041、0．532±0．022，两组比较，P均＜0．05。 CAR siRNA组与对照组TER分别为（37±2．5）、（50±3．0）ohm＆#183; cm2，两组比较，P＜0．05。 CAR siRNA组与对照组Occludin蛋白相对表达量分别为0．164±0．025、0．143±0．031，两组比较，P＞0．05。对照组Occludin呈蜂巢样沿细胞膜线状分布；CAR siRNA组Occludin分布较紊乱，细胞膜处减少，线性分布破坏，细胞质内增多。 CAR siRNA组、对照组细胞中与EEA1结合的Occludin蛋白量分别为1．332±0．018、1．000±0．015，两组比较，P＜0．05。结论 CAR siRNA能增加睾丸支持细胞上皮屏障通透性，其机制可能与其诱导Occludin蛋白内吞增强而分布改变有关。

关键词：睾丸支持细胞上皮屏障 

单位：温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 浙江温州325027